利用放射性标记DARPin Ec1成像卵巢癌EpCAM表达的可行性
Anzhelika Vorobyeva et al., International Journal of Molecular Sciences, 2020
高达85%的卵巢癌患者在确诊时已处于晚期，此时癌细胞已发生全身转移。本研究旨在利用小鼠异种移植模型探索更高效的诊断与治疗方法。
由于上皮细胞黏附分子（EpCAM）在55%–75%的卵巢癌（OC）中过表达，其可能成为潜在治疗靶点。设计的锚蛋白重复蛋白（DARPin）Ec1以亚纳摩尔级亲和力与EpCAM结合。本研究采用N-琥珀酰亚胺基-对碘苯甲酸酯（PIB）对DARPin Ec1进行125I标记，并将其注射到携带SKOV-3或OVCAR-3异种移植物的小鼠体内。体外实验显示，该标记蛋白与卵巢癌细胞具有高度特异性结合，且内化速度缓慢——这对注射后数小时的体内成像至关重要。SPECT/CT图像的体内 biodistribution 分析表明，卵巢癌异种移植物上的EpCAM可充分被DARPin接近，为DARPin介导的细胞毒性载荷递送提供了可行性。
为建立异种移植物模型，将10⁷个SKOV-3和OVCAR-3细胞或5×10⁶个Ramos细胞（EpCAM阴性淋巴瘤异种移植物作为特异性对照）悬浮于100µl培养基中，皮下注射到雌性Balb/c nu/nu小鼠的右后腿。携带SKOV-3和Ramos异种移植物的小鼠实验在植入后2-3周进行，携带OVCAR-3异种移植物的小鼠实验在植入后7周进行。
向小鼠注射125I-PIB-Ec1（SKOV-3模型：20µg，1.2MBq；OVCAR-3模型：6µg，2.8MBq），注射后6小时（pi）使用nanoScan SPECT/CT采集图像，扫描时长20分钟。
体外研究显示，125I-PIB-Ec1与SKOV-3和OVCAR-3细胞具有特异性结合，表现为结合迅速、解离和内化缓慢。
SPECT/CT成像表明，放射性标记的125I-PIB-Ec1可清晰显示两种EpCAM阳性异种移植物。体内 biodistribution 特征为高肿瘤-器官比值，仅肾脏出现明显放射性摄取。
